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发布时间:2021-12-26 09:53:00 作者:慧宇昊
生物安全柜检测-生物安全柜的分级
按照NSF49标准,生物安全等级1级(P1)的媒质是指普通无害细菌、病毒等微生物;生物安全等级2级(P2)的媒质是指一般性可致病细菌、病毒等微生物;生物安全等级3级(P3)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物,但后可;生物安全等级4级(P4)的媒质是指烈性/致命细菌、病毒等微生物,后不易。此标准将生物安全柜分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级,可适用于不同生物安全等级媒质的操作。
生物安全柜检测注意事项
1. 为了避免物品间的交叉污染,整个工作过程中所需要的物品应在工作开始前一字排开放置在安全柜中,以便在工作完成前没有任何物品需要经过空气流隔层拿出或放入,特别注意:前排和后排的回风格栅上不能放置物品,以防止堵塞回风格栅,影响气流循环。
2. 在开始工作前及完成工作后,需维持气流循环一段时间,完成安全柜的自净过程,每次试验结束应对柜内进行清洁和消毒。
3. 操作过程中,尽量减少双臂进出次数,双臂进出安全柜时动作应该缓慢,避免影响正常的气流平衡。
4. 柜内物品移动应按低污染向高污染移动原则,柜内实验操作应按从清洁区到污染区的方向进行。操作前可用消毒剂浸湿的毛巾垫底,以便吸收可能溅出的液滴。
5. 尽量避免将离心机、振荡器等仪器安置在安全柜内,以免仪器震动时滤膜上的颗粒物质抖落,导致柜内洁净度下降;同时这些仪器散热排风口气流可能影响柜内的气流平衡。
6. 安全柜内不能使用明火,防止燃烧过程中产生的高温细小颗粒杂质带入滤膜而损伤滤膜。
生物安全柜检测标准依据主要指标的区别
尽管欧美两项标准不同,但是在大体上拥有很大的相似性,这两项标准为用户提供了同样水平的质量和安全保障。EN 12469:2000在测量性规定方面与NSF,ANSI 49—202相比略有逊色,而在某些测量方法和要求方面(例如KI—Discus测试、气流报警系统等)也较有优势。我国的标准YY 0569—205在吸收了欧美标准中佳方法的基础上,又创新编制了主编人都不知道如何实现的的测试方法,所以说是目前难执行的标准。我国的标准JG 170—205对型式试验和出厂检验的项目作了细分,出厂检验的项目相对简化,增加了标准的可操作性。
将盛有5×108/mL~8×108/mL的芽孢悬浮液的喷雾器放在生物安全柜内,喷雾器喷嘴的轴线在工作台面上方360mm处,喷嘴前端位于前窗操作口内100mm处,喷雾方向平行于台面且正对操作口;喷雾器的圆筒固定在台面上的ZX,一端贴住工作区的后壁,另一端从操作口伸出生物安全柜至少150mm,圆筒的轴线高于台面70mm;6个撞击采样器呈左右对称放置在柜前,6个采样口正对生物安全柜;1个阳性对照琼脂培养皿放在圆筒下;2个狭缝采样器的采样口平面与台面平行,采样口的垂直轴线在生物安全柜前方150mm处,各距内侧壁200mm;启动喷雾器,运行5min。测试持续30min。
在无菌的条件下,用滤膜滤取所有撞击采样器的采样液体,将滤膜置于培养基上;有滤膜的培养基、对照培养皿和狭缝采样器的培养皿在37.0℃培养。培养到24~28h时检查计数,如果呈阴性,继续培养至总培养时间达44~48h时检查计数。
Ⅱ级生物安全柜用枯草芽孢芽孢进行实验,从全部撞击采样器收集的芽孢菌菌落数应不超过10CFU/次,狭缝采样器的培养皿收集的芽孢菌菌落数应不超过5CFU/次,对照皿应阳性(>300CFU)。
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