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生物安全柜

生物安全柜(biological safety cabin.BSC)是能防止实验操作处理过程中某些含有危险性或未知性生物微粒发生气溶胶散逸的箱型空气净化负压安全装置。其广泛应用于微生物学、生物医学、基因工程、生物制品等领域的科研、教学、临床检验和生产中，是实验室生物安全中一级防护屏障中基本的安全防护设备

生物安全柜的作业指导书

1 目的用于实验室的主要隔离设备,可以防止有害悬浮微粒的扩散,对人员样品和环境提供保护。确保被检样品无污染，准确反映样品本身卫生状况，监测数据准确可靠。 

2 适用范围被检样品的微生物质量检测。

3 操作程序

3.1主机通电，并开动安全柜内风机，等待气流显示正常。好等待15分钟后再工作，并开启紫外灯，杀灭工作区域残留细菌。

3.2工作区可用70%酒精或类似非腐蚀性的物品进行擦洗、消毒。

3.3把有关物品放进去，注意不要放在前面孔板上，并把干净的、脏的、带菌的物品分开防置。放好物品后等待2~3分钟进流冲洗工作。

3.4开始工作，带手套、袖套，工作前后用肥皂洗手。如制备抗注意以下各项： 3.4.1做一些混合工作时，在工作台面放一块无菌的、能吸收的布。当有东西溅出及工作结束后，更换这块布。

3.4.2放入的小瓶子内部不要有压力或真空，否则要用过滤针破空。

3.4.3打开安泡瓶时，注意不要在安泡瓶尖上留下液体，并用无菌的棉布擦一下安泡瓶的开口颈部。

3.4.4先计量好药品，再把针从小瓶的瓶盖上拔出来。 3.4.5在生物安全柜内放一个收集废弃溶液的容器。

完成工作后，等待2~3分钟，去掉所有物品后，内表面作去污染工作，特别注意孔板部分有无污染及清除。

关机前，开启紫外灯运行，让设备运行15分钟，让机器内部自净，然后关灯，关风机，关机。

将盛有5×108/mL~8×108/mL的芽孢悬浮液的喷雾器放在生物安全柜内，喷雾器喷嘴的轴线在工作台面上方360mm处，喷嘴前端位于前窗操作口内100mm处，喷雾方向平行于台面且正对操作口;喷雾器的圆筒固定在台面上的ZX，一端贴住工作区的后壁，另一端从操作口伸出生物安全柜至少150mm，圆筒的轴线高于台面70mm;6个撞击采样器呈左右对称放置在柜前，6个采样口正对生物安全柜;1个阳性对照琼脂培养皿放在圆筒下;2个狭缝采样器的采样口平面与台面平行，采样口的垂直轴线在生物安全柜前方150mm处，各距内侧壁200mm;启动喷雾器，运行5min。测试持续30min。

在无菌的条件下，用滤膜滤取所有撞击采样器的采样液体，将滤膜置于培养基上;有滤膜的培养基、对照培养皿和狭缝采样器的培养皿在37.0℃培养。培养到24~28h时检查计数，如果呈阴性，继续培养至总培养时间达44~48h时检查计数。

Ⅱ级生物安全柜用枯草芽孢芽孢进行实验，从全部撞击采样器收集的芽孢菌菌落数应不超过10CFU/次，狭缝采样器的培养皿收集的芽孢菌菌落数应不超过5CFU/次，对照皿应阳性(>300CFU)。